New insights into CAR T cell-mediated killing of tumor cells.

Adoptive transfer of T cells genetically engineered to express chimeric antigen receptors (CAR) has demonstrated striking efficacy for the treatment of several hematological malignancies, including B-cell lymphoma, leukemia, and multiple myeloma. However, CAR T-cell efficacy has been very limited in most solid tumors. In this context, it is of paramount importance to understand the determinants that condition CAR T-cell success versus failure. To control tumor growth, CAR T cells need to form conjugates with their targets via the assembly of an immunological synapse. Here, we review recent advances showing that the adhesion between CAR T cells and cancer cells from solid tumors strengthens over time in an IFNγ- and ICAM-1-dependent manner, resulting in CAR T cell-mediated killing. We discuss how these findings can be exploited to increase the efficacy of the CAR T-cell strategy against solid tumors.

Latent tuberculosis screening before kidney transplantation in the South of Brazil / Rastreamento de tuberculose latente antes do transplante renal no Sul do Brasil

Abstract Background: Tuberculosis (TB) is a prevalent infection after kidney transplantation (KT) in high-burden countries. Latent tuberculosis infection (LTBI) screening includes previous TB history, chest radiograph findings, and tuberculin test (TST) and/or interferon-gamma release assays (IGRAs) results. We aimed to compare our routine LTBI screening of KT candidates and living donors (LD) with their IGRA results, and evaluate if this would improve isoniazid (INH) treatment referral. Methods: We evaluated adult KT candidates and LD with complete routine LTBI screening and QuantiFERON-TB® Gold In-Tube (QFT) testing. Blood samples were collected from April 4th, 2014 to October 31st, 2018, with follow-up until October 31st, 2019. Results: There were 116 KT recipients, with 30% QFT-positive results. Positive QFT was associated with past TB history (p=0.007), positive TST (p<0.0001), residual radiographic lesions (p=0.003), and diabetes (p=0.035). There were 25 LD, 40% had positive QFT. Positive QFT was associated with a positive TST (p=0.002). Positive QFT results increased INH referral in 80%. Post-transplant TB incidence was 2.6% in a median follow-up of 2 (1-33) months. No variables were associated with post-transplant TB. TB patients had inferior, although non-significant, 5-year graft survival (66.7% vs. 76.5%) (p = 0.402). Conclusion: In the present study, the association of QFT to our routine LTBI screening incremented INH treatment referral, but there was still a high incidence of post-transplant TB, possibly related to other forms of infection, such as new exposure and donor transmission.

Resumo Histórico: Tuberculose (TB) é uma infecção relativamente comum pós-transplante renal (TR) em países com alta prevalência da doença. O rastreamento de infecção latente por tuberculose (ILTB) inclui histórico prévio de TB, achados de radiografia do tórax, resultados do teste tuberculínico (TT) e/ou de ensaio de liberação de interferon-gama (IGRAs). Nosso objetivo foi comparar nossa avaliação de rotina de candidatos ao TR e doadores vivos (DV) com seus resultados de IGRA, avaliando se aumentaria o encaminhamento para tratamento com isoniazida (INH). Métodos: Avaliamos candidatos adultos ao TR e DV com rastreamento para ILTB de rotina completo e coleta de testes QuantiFERON-TB® Gold In-Tube (QFT). Coletamos amostras sanguíneas de 4 de Abril, 2014 - 31 de Outubro, 2018, com acompanhamento até 31 de Outubro, 2019. Resultados: Avaliamos 116 receptores de TR, 30% sendo QFT-positivo. QFT positivo foi associado ao histórico prévio de TB (p=0,007), TT positivo (p<0,0001), lesões radiográficas residuais (p=0,003), diabetes (p=0,035). Avaliamos 25 DV, 40% apresentaram QFT positivo. QFT positivo foi associado a TT positivo (p=0,002). Resultados positivos do QFT aumentaram o encaminhamento para INH em 80%. A incidência de TB pós-transplante foi 2,6% em uma mediana de acompanhamento de 2 (1-33) meses. Nenhuma variável foi associada à TB pós-transplante. Pacientes com TB tiveram sobrevida do enxerto em 5 anos inferior, embora não-significativa (66,7% vs. 76,5%) (p = 0,402). Conclusão: Neste estudo, a associação do QFT à nossa avaliação de ILTB de rotina aumentou o encaminhamento para tratamento com INH, mas ainda houve alta incidência de TB pós-transplante, possivelmente relacionada a outras formas de infecção, como nova exposição e transmissão pelos doadores.

The Architecture of Circulating Immune Cells Is Dysregulated in People Living With HIV on Long Term Antiretroviral Treatment and Relates With Markers of the HIV-1 Reservoir, Cytomegalovirus, and Microbial Translocation.

Long-term changes in the immune system of successfully treated people living with HIV (PLHIV) remain incompletely understood. In this study, we assessed 108 white blood cell (WBC) populations in a cohort of 211 PLHIV on stable antiretroviral therapy and in 56 HIV-uninfected controls using flow cytometry. We show that marked differences exist in T cell maturation and differentiation between PLHIV and HIV-uninfected controls: PLHIV had reduced percentages of CD4+ T cells and naïve T cells and increased percentages of CD8+ T cells, effector T cells, and T helper 17 (Th17) cells, together with increased Th17/regulatory T cell (Treg) ratios. PLHIV also exhibited altered B cell maturation with reduced percentages of memory B cells and increased numbers of plasmablasts. Determinants of the T and B cell composition in PLHIV included host factors (age, sex, and smoking), markers of the HIV reservoir, and CMV serostatus. Moreover, higher circulating Th17 percentages were associated with higher plasma concentrations of interleukin (IL) 6, soluble CD14, the gut homing chemokine CCL20, and intestinal fatty acid binding protein (IFABP). The changes in circulating lymphocytes translated into functional changes with reduced interferon (IFN)- γ responses of peripheral blood mononuclear cells to stimulation with Candida albicans and Mycobacterium tuberculosis. In conclusion, this comprehensive analysis confirms the importance of persistent abnormalities in the number and function of circulating immune cells in PLHIV on stable treatment.

Interferon-gamma signaling is downregulated in peripheral blood mononuclear cells from asthma patients / A sinalização de interferon-gama é diminuída em células mononucleares do sangue periférico de pacientes asmáticos

Introduction: Interferon-gamma (IFN-g) signaling is mediated by crosstalk of receptors, such as IFN-g receptor 1 (IFN-g R1), transcription factors, such as signal transducer and activator of transcription 1 (STAT1) and suppressors of cytokine signaling 1 (SOCS1). Here, we evaluated the role of IFN-g signaling in peripheral blood mononuclear cells (PBMCs) from asthma patients and control individuals. Methods: PBMCs from adult healthy nonasthmatic controls (n = 12; male and female, 18-60 years old) and patients diagnosed with asthma (n = 18; male and female, 18-60 years old) were stimulated with IFN-g (0.25, 0.5 and/or 1.0 ng/mL) and, after 24h, the production of CXC motif chemokine 10 (CXCL10) was evaluated (by enzyme linked immunosorbent assay) as well as the expression of IFN-g R1, STAT1 (both by flow cytometry assay) and SOCS1 (by real-time qPCR assay). Results: CXCL10 production was reduced in a dose-dependent manner in PBMCs from asthma patients stimulated with IFN-g when compared to control individuals. While IFN-g induced an increase in IFN-g R1 expression and phosphorylated STAT1 (pSTAT1) activation in PBMCs from the control group, a reduction in both IFN-g R1 and pSTAT1 was observed in PBMCs from asthma patients. IFN-g increased SOCS1 mRNA expression in PBMCs from asthma patients when compared to IFN-g-stimulated cells from control individuals. Conclusion: Taken together, our results demonstrated that IFN-g signaling is downregulated in asthma patients.

Introdução: A sinalização de interferon-gama (IFN-g) é mediada por receptores, como o receptor 1 de IFN-gama (IFN-gR1), fatores de transcrição, como o transdutor de sinal e o ativador de transcrição 1 (STAT1) e supressores de sinalização de citocina 1 (SOCS1). Neste trabalho, avaliamos o papel da sinalização de IFN-g em células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de indivíduos com asma e controle. Métodos: Células mononucleares do sangue periférico (PBMCs) de adultos saudáveis e não asmáticos (n = 12, homens e mulheres, 18-60 anos) e pacientes diagnosticados com asma (n = 18, homens e mulheres, 18-60 anos) foram estimuladas com IFN-g (0,25, 0,5 e/ou 1,0 ng/mL) e após 24 horas a produção de CXCL10 foi avaliada por ensaio de imunoabsorção enzimática (ELISA), bem como o receptor 1 de IFN-g (IFN-g R1). Também foram avaliadas as expressões do transdutor de sinal e ativador da transcrição 1 (STAT1) (por citometria de fluxo) e supressor de expressão de sinalização de citocinas 1 (SOCS1) (por ensaio qPCR em tempo real). Resultados: A produção de CXCL10, uma quimiocina induzida por IFNg, foi reduzida de maneira dependente da dose em PBMCs de pacientes com asma estimulados com IFN-g (0,25-1,0 ng/mL) quando comparado ao grupo controle. Enquanto IFN-g induziu um aumento da expressão de IFN-g R1 e ativação da fosforilação de STAT1 (pSTAT1) em PBMCs do grupo controle, uma redução de ambas (IFN-g R1 e pSTAT1) foi observada em PBMCs de pacientes com asma. O IFN-g aumentou as PBMCs de expressão do mRNA de SOCS1 de pacientes com asma quando comparado às células estimuladas por IFN-g do controle. Conclusão: Em conjunto, nossos resultados demonstraram que a sinalização de IFN-g é sub-regulada em pacientes com asma.

Comparação do ensaio de inteferon-gamma e teste cutâneo tuberculínico para diagnóstico de tuberculose latente em profissionais de saúde de um centro de referência terciária para tuberculose do Estado da Bahia / Comparation of the interferon gamma release assay and tuberculin skin test for diagnosis of latent tuberculosis in health professionals at a tertiary tuberculosis reference center, State of Bahia

Introdução: o Teste Cutâneo Tuberculínico (TCT) tem sido utilizado como diagnóstico para a Tuberculose Infecção Latente (TBIL). Os profissionais de saúde, principalmente os que trabalham com assistência a pacientes com tuberculose (TB), têm risco elevado de contrair a doença ou a TBIL. Normas de biossegurança e qualificação da equipe de trabalho são fundamentais para o controle da Tb entre os profissionais de saúde. Atualmente testes diagnósticos mais específicos para a TBIL têm sido utilizados como alternativa para o padronizado TCT, dentre eles o QuantiFERON-TB Gold (QTF®). Objetivo: comparar e avaliar os resultados obtidos no QTF® e Teste Cutâneo Tuberculínico dos profissionais de saúde de um centro de referência terciário para Tuberculose. Metodologia: o projeto foi aprovado pelo Comitê de Ética em Pesquisa da Fundação Bahiana Desenvolvimento Científico e pelo Comitê de Ética em Pesquisa da instituição hospitalar. Foi utilizado o banco de dados do setor de medicina ocupacional da Instituição e os 87 voluntários que atenderam aos critérios do estudo foram categorizados e distribuídos em dois grupos: TCT negativo (<5mm) e TCT positivo (>5mm). Foi realizada coleta de sangue para o teste QTF®. Resultados: dos 47 profissionais de saúde TCT negativo 53,2% tiveram resultado QTF negativo. Dos 40 profissionais TCT positivo, 67,5% apresentaram resultado QTF® positivo. O grau de concordância do índice kappa foi de 0,24. Conclusão: O QTF® não mostrou uma especificidade superior quando comparado ao TCT.

Introduction: tuberculin Skin test (TST) is a test used to Latent tuberculosis Infection (LTBI) diagnosis. Health professional, principally those that work with tuberculosis (TB) patients, have a high risk of contract and developing the disease or LTBI. Biosecurity norms and professional qualification are fundamentals to TB control in care centers. Actually some diagnosis tests with higher specificity of LTBI are used as an alternative to the TST, such as QuantiFERON-TB Gold (QTF®). Objective: to compare and evaluate the results obtained in the Quantiferon-TB Gold® and TST, of health professionals from a tertiary referral center for Tuberculosis. Methodology: the project was approved by a Research Ethics Committee of FBDC, and by the CEP of the hospital institution. The data base of the occupational medicine sector and the health professionals were categorized and distributed in two groups: Negative Tuberculin test and Positive Tuberculin test. The 93 volunteers who met the criteria and agreed to participate, signed the consent form, with subsequent data collection. A blood collection was also performed to perform Quantiferon-TB Gold® test. Results: of the 47 PS negative Tuberculin test, 53.2% had negative Quantiferon-TB Gold® results and 46.8% positive. Of the health professional positive Tuberculin test, 32.5% presented negative Quantiferon-TB Gold® result and 67.5% positive. Conclusion: quantiferon-TB Gold® did not show superior specificity when compared to Tuberculin test on this coorte.

Nasal pneumococcal density is associated with microaspiration and heightened human alveolar macrophage responsiveness to bacterial pathogens

Rationale: Pneumococcal pneumonia remains a global health problem. Colonization of the nasopharynx with Streptococcus pneumoniae (Spn), although a prerequisite of infection, is the main source of exposure and immunological boosting in children and adults. However, our knowledge of how nasal colonization impacts on the lung cells, especially on the predominant alveolar macrophage (AM) population, is limited. Objectives: Using a controlled human infection model to achieve nasal colonization with 6B serotype, we investigated the effect of Spn colonization on lung cells. Methods: We collected BAL from healthy pneumococcal-challenged participants aged 18–49 years. Confocal microscopy and molecular and classical microbiology were used to investigate microaspiration and pneumococcal presence in the lower airways. AM opsonophagocytic capacity was assessed by functional assays in vitro, whereas flow cytometry and transcriptomic analysis were used to assess further changes on the lung cellular populations. Measurements and Main Results: AMs from Spn-colonized individuals exhibited increased opsonophagocytosis to pneumococcus (11.4% median increase) for approximately 3 months after experimental pneumococcal colonization. AMs also had increased responses against other bacterial pathogens. Pneumococcal DNA detected in the BAL samples of Spn-colonized individuals were positively correlated with nasal pneumococcal density (r=0.71; P=0.029). Similarly, AM heightened opsonophagocytic capacity was correlated with nasopharyngeal pneumococcal density (r=0.61, P=0.025). Conclusions: Our findings demonstrate that nasal colonization with pneumococcus and microaspiration prime AMs, leading to brisker responsiveness to both pneumococcus and unrelated bacterial pathogens. The relative abundance of AMs in the alveolar spaces, alongside their potential for nonspecific protection, render them an attractive target for novel vaccines.

Uso de Quantiferon Gama no diagnóstico de meningite tuberculosa na criança: um relato de caso / Use of Quantiferon Gama in the diagnosis of meningeal tuberculosis in the child: a case report

Existem várias formas de infecção pelo bacilo M. tuberculosis, a meníngea é a mais grave delas. Por possuir efeitos colaterais graves e um longo tratamento o diagnóstico preciso é imprescindível para justificar o tratamento precoce da doença. Os métodos tradicionais de diagnóstico muitas vezes são insuficientes, sendo necessário o uso de exames mais modernos, que apesar de maior custo, apresentam menores índices de erros diagnósticos. Sendo assim, faz-se necessário o uso de exames com maior sensibilidade e especificidade, como o Quantiferon Gama. Relata-se o caso de um paciente masculino, 10 anos, admitido por cefaleia, sonolência, vômitos e rigidez de nuca. Exames tradicionais não ajudaram no diagnóstico, com necessidade de Quantiferon Gama (QTF-G) para diagnóstico definitivo de TB.

There are several forms of infection by the M. tuberculosis bacillus, the meningeal is the most serious of them. Because it has serious side effects and a long treatment, the precise diagnosis is essential to justify the early treatment of the disease. Traditional diagnostic methods are often insufficient, requiring the use of more modern tests, which, despite higher costs, have lower rates of diagnostic errors. Therefore, it is necessary to use tests with greater sensitivity and specificity, such as the Quantiferon Gamma. We report the case of a male patient, 10 years old, admitted for headache, drowsiness, vomiting and neck stiffness. Traditional exams did not help in the diagnosis, requiring Quantiferon Range (QTF-G) for diagnosis of TB.

Tuberculose latente entre pessoas com HIV/AIDS / Latent tuberculosis among people with HIV/AIDS

Objetivo: buscar evidências sobre o uso da terapia preventiva com isoniazida na redução do risco da tuberculose ativa entre as pessoas vivendo com HIV/Aids mediante os resultados dos ensaios de liberação do interferon-gama (IGRA). Método: trata-se de estudo bibliográfico, descritivo, tipo revisão integrativa, com busca de artigos nas bases de dados publicados de 2010 a 2017. Os descritores utilizados foram HIV, AIDS, terapia preventiva com isoniazida, tratamento da infecção latente da tuberculose, interferon-gama, ensaios de liberação do interferon-gama. Resultados: selecionaram-se três artigos, com 1815 PVHA e desenvolvimento de tuberculose em apenas um caso, após 24 meses de terapia preventiva com isoniazida. Altas taxas de reversão e conversão durante o seguimento. Conclusão: consideraram-se os estudos abordando os benefícios da terapia preventiva com isoniazida a partir do resultado do IGRA apresentam-se escassos, com incipiente sugestão da limitação do teste seriado para o seguimento da resposta da terapia entre as PVHA. Além disso, destaca-se a necessidade de se investir em mais estudos que explorem a temática e superem as limitações já encontradas tendo em vista a alta relevância de se investir em novas estratégias que impactem o controle da coinfecção TB/HIV.(AU)

Frequency of indeterminate results from an interferon-gamma release assay among HIV-infected individuals / Taxa de resultados indeterminados de ensaio de liberação de interferon-gama entre pessoas infectadas pelo HIV

ABSTRACT Objective: To evaluate the frequency of and factors associated with indeterminate interferon-gamma release assay (IGRA) results in people living with HIV/AIDS (PLWHA). Methods: We tested 81 PLWHA in the central-west region of Brazil, using the tuberculin skin test and an IGRA. Information on sociodemographic and clinical variables was gathered through the use of questionnaires and from medical records. The association of those variables with indeterminate results was analyzed by calculating the adjusted ORs in a multivariate logistic regression model. Concordance was evaluated by determining the kappa statistic. Results: Among the 81 patients evaluated, the tuberculin skin test results were positive in 18 (22.2%) of the patients, and the IGRA results were positive in 10 (12.3%), with a kappa of 0.62. The IGRA results were indeterminate in 22 (27.1%) of the patients (95% CI: 17.8-38.1%). The odds of obtaining indeterminate results were significantly higher in smokers (adjusted OR = 6.0; 95% CI: 1.4-26.7) and in samples stored for less than 35 days (adjusted OR = 14.0; 95% CI: 3.1-64.2). Patients with advanced immunosuppression (CD4+ T-cell count < 200 cells/mm3) were at a higher risk for indeterminate results (OR adjusted for smoking and inadequate duration of sample storage = 4.7; 95% CI: 0.91-24.0), although the difference was not significant. Conclusions: The high prevalence of indeterminate results can be a major limitation for the routine use of IGRAs in PLWHA. The need to repeat the test increases its costs and should be taken into account in cost-effectiveness studies. The processing of samples can significantly alter the results.

RESUMO Objetivo: Avaliar a frequência de resultados indeterminados de um interferon-gamma release assay (IGRA, ensaio de liberação de interferon-gama) e os fatores relacionados com esses resultados em pessoas vivendo com HIV/AIDS (PVHA). Métodos: Foram avaliadas 81 PVHA na região Centro-Oeste do Brasil, por meio do teste tuberculínico e de um IGRA. Informações a respeito de variáveis sociodemográficas e clínicas foram obtidas por meio de questionários e prontuários médicos. A relação entre essas variáveis e os resultados indeterminados foi avaliada por meio do cálculo da OR ajustada em um modelo de regressão logística multivariada. A concordância foi avaliada por meio do coeficiente kappa. Resultados: Os resultados do teste tuberculínico e do IGRA foram positivos em 18 (22,2%) e 10 (12,3%), respectivamente, dos 81 pacientes avaliados (κ = 0,62). O resultado do IGRA foi indeterminado em 22 (27,1%) dos pacientes (IC95%: 17,8-38,1%). A chance de resultados indeterminados foi significativamente maior em fumantes (OR ajustada = 6,0; IC95%: 1,4-26,7) e em amostras armazenadas durante menos de 35 dias (OR ajustada = 14,0; IC95%: 3,1-64,2). Pacientes com imunossupressão avançada (contagem de células T CD4+ < 200 células/mm3) apresentaram maior risco de resultados indeterminados (OR ajustada para tabagismo e tempo inadequado de armazenamento das amostras = 4,7; IC95%: 0,91-24,0), embora a diferença não tenha sido significativa. Conclusões: A alta prevalência de resultados indeterminados pode ser um grande obstáculo ao uso rotineiro de IGRAs em PVHA. A necessidade de repetir o teste aumenta seu custo e deve ser levada em conta em estudos da relação entre custo e eficácia. O processamento das amostras pode alterar significativamente os resultados.

Protective effect of carnosine after chronic cerebral hypoperfusion possibly through suppressing astrocyte activation.

AIM: Subcortical ischemic vascular dementia (SIVD) induced by chronic hypoperfusion is a common cause of vascular dementia. The aim of this study was to determine whether the protective effect of carnosine on white matter lesion after chronic cerebral hypoperfusion through suppressing astrocyte activation. METHODS: Adult male mice (C57BL/6 strain) were subjected to permanent occlusion of the right unilateral common carotid arteries (rUCCAO) and treated with carnosine or histidine. Open field test, freezing test, Klüver-Barrera staining, immunohistochemical analyses and western blot were performed after rUCCAO. RESULTS: We found that carnosine ameliorated white matter lesion and cognitive impairment after rUCCAO. Carnosine suppressed the activation of astrocyte in both wide type mice and histidine decarboxylase knockout mice. However, administration of histidine did not show the same effect. We found that there were no differences between rUCCAO group and sham group for the expression of glutamate transporter-1 (GLT-1) and glutamate/aspartate transporter (GLAST). Furthermore, carnosine significantly attenuated the increase of inflammatory cytokine interferon gama. CONCLUSION: These data suggest carnosine induced neuroprotection during SIVD in mice is not dependent on the histaminergic pathway or the regulation of the expression of GLT-1 and GLAST, but may be due to a suppression of astrocyte activation and inflammatory cytokine release.

Expressão do interferon-γ em biópsias gengivais de pacientes com periodontite crônica severa / Expression of interferon-γ in gingival biopsies from patients with severe chronic periodontitis

O objetivo desse estudo foi analisar a expressão do interferon gama (INF-γ) em biópsias gengivais de sítios rasos e profundos de pacientes com periodontite crônica severa, e correlacionar a expressão do INF- γ no fluido gengival. Foram coletadas biópsias de 22 sítios profundos, 18 sítios rasos e 14 sítios controles. O fluido gengival foi coletado de 12 sítios profundos e 8 sítios rasos. Profundidade de bolsa à sondagem (PB); nível de inserção clínica (NIC); índice de placa visível (IPV) e índice de sangramento gengival (ISG) foram avaliados. As análises morfológica e imuno-histoquímica dos tecidos removidos foram realizadas. A intensidade da marcação do INF- γ nos tecidos foi avaliada semiquantitativamente. Houve uma tendência a um padrão de marcação similar nos sítios rasos e profundos, com predomínio de marcação fraca nos sítios profundos. Não houve diferenças estatisticamente significantes entre os três grupos. Não houve correlação significante (Spearman) com a expressão do INF- γ nos tecidos epiteliais e conjuntivos com os dados clínicos e o fluido gengival. Concluímos que não foi possível observar diferenças na expressão do INF- γ em biópsias gengivais nos sítios rasos e profundos de pacientes com periodontite quando comparados à indivíduos saudáveis, o que pode ser atribuído ao caráter bifásico do INF- γ.

The aim of this study was to analyze the expression of interferon-gamma (INF-γ) in gingival biopsies from shallow and deep sites in patients with severe chronic periodontitis and correlate the expression of INF-γ in the gingival crevicular fluid (GCF). Biopsies were collected from 22 deep sites, 18 shallow sites and 14 control sites. The GCF samples were collected from 12 deep and 8 shallow sites. Probing pocket in the epithelial and connective tissues with the clinical data and with the GCF. We conclude that there were no differences in the expression of INF-γ in gingival biopsies in shallow and deep sites of pacients with periodontitis compared to healthy subjects, which may be attributed to the biphasic character of INF-γ.

The value of adenosine deaminase, interferon-gamma, and interferon-gamma induced protein of 10KD in the diagnosis of tuberculous pleuritis / 解放军医学杂志

Objective To explore the value of adenosine deaminase (ADA) activity, interferon-gamma (IFN-γ) and IFN-γ induced protein of 10kD (IP-10) levels in pleural effusion for the diagnosis of tuberculous pleuritis. Methods ADA activity, IFN-γ and IP-10 levels in pleural effusion were determined in sixty-three patients with tuberculous pleuritis and 50 patients with malignant pleural effusion. Results The mean levels of ADA, IFN-γ and IP-10 in the tuberculous pleural effusion were significantly higher than those in malignant pleural effusion (P<0.01). When 45U/L was regarded as cut off value for ADA, the sensitivity, specificity and diagnostic odds ratio in the diagnosis of tuberculous pleurisy were 71.4%, 94.0% and 39.17 respectively. When 138.5pg/ml was regarded as cut off value for IFN-γ in tuberculous pleural effusion, the sensitivity, specificity and diagnostic odds ratio were 93.7%, 82.0% and 67.19 respectively. When 9.21μg/ml was regarded as cut off value for IP-10 in tuberculous pleural effusion, the sensitivity, specificity and diagnostic odds ratio were 85.7%, 90.0% and 54.00 respectively. The combined determination of the three markers for the diagnosis of tuberculous pleurisy had a sensitivity of 95.2%, specificity of 96.0% and diagnostic odds ratio of 72.16. Conclusion The accuracy of diagnosis for tuberculous pleurisy can be improved by combined determination of ADA, IFN-γ and IP-10.

Pesquisa de infección tuberculosa latente en personal de la salud en cuatro instituciones de salud en Santiago de Chile / Latent tuberculosis infection screening in healthcare workers in four large hospitals in Santiago, Chile

Background: It is currently unknown which is the prevalence of latent tuberculosis infection in healthcare workers in Chile, but this group has been described as at higher risk of developing active tuberculosis than general population. Objectives: To determine the prevalence of latent tuberculosis infection in a sample of healthcare workers from at risk areas. Methodology: A cross-sectional, descriptive study, conducted in health care workers from clinical laboratories or respiratory care areas in four hospitals in Santiago. Latent tuberculosis infection detection was determined by Quantiferon® TB Gold In Tube testing (QFT). Results: QFT resulted positive in 20 of 76 (26.3%) of the individuals tested. Test positivity reached 62.5% among the personnel that reported history of past TB contact in the community, 50% among the personnel who belonged to the national tuberculosis control program and 38% among those doing induced sputum, acid fast smear or mycobacterial cultures. The proportion of individuals with positive QFT was significantly lower in those personnel who had no such risk factors (15.7%, p = 0.03). The proportion of latent tuberculosis infection also increased in direct relation to the age of the subject. Conclusion: Latent tuberculosis infection as detected by QFT testing was highly prevalent in healthcare workers included in the present study. Further exploring the limitations and possible scenarios for this new diagnostic tool is needed, with emphasis on health personnel at higher-risk and younger individuals.

Introducción: Se desconoce en la actualidad cuál es la real prevalencia de infección tuberculosa latente en el personal de salud en Chile; sin embargo, este grupo ha sido descrito como con mayor riesgo de desarrollar tuberculosis activa que la población general. Objetivo: Determinar la prevalencia de infección tuberculosa latente en funcionarios de la salud en diferentes áreas laborales de riesgo. Metodología: Estudio de corte transversal, descriptivo, realizado en funcionarios pertenecientes a laboratorios clínicos o áreas de atención broncopulmonar de cuatro hospitales de la Región Metropolitana en quienes se hizo test de Quantiferon TB Gold®In tube(QFT). Resultados: Se evidenció infección tuberculosa latente en 20 de las 76 (26,3%) personas estudiadas. En aquellos funcionarios que referían antecedente de contacto en el pasado en la comunidad con enfermos de tuberculosis, la positividad del test llegó a 62,5%; en aquellos que pertenecían al Programa Nacional de Control de la Tuberculosis, a 50% y en los que realizaban toma de esputo inducido, baciloscopias o cultivo de micobacterias, a 38%. La proporción de individuos con QFT positivo fue significativamente menor en aquellos funcionarios que no tenían estos antecedentes (15,7%, p = 0,03). Se encontró además una mayor proporción de infección tuberculosa latente a mayor edad del individuo estudiado. Conclusión: La infección tuberculosa latente medida por QFT resultó altamente prevalente en el personal de la salud incluido en el presente estudio. Es necesario seguir profundizando en los posibles escenarios de implementación y limitaciones del uso de esta nueva herramienta diagnóstica, haciendo énfasis en el personal de la salud de mayor riesgo y menor edad.

Lymphadenitis caused by infection with an isoniazid- and rifampin-resistant strain of Mycobacterium bovis BCG in an infant with IFN-γ/IL-12 pathway defect / Linfadenite por Mycobacterium bovis BCG resistente a isoniazida e rifampicina em lactente com defeito no eixo IFN-γ/IL-12

We report a rare case in a female infant (age, 3.5 months) with primary immunodeficiency (IFN-γ/IL-12 pathway defect) who presented with suppurative lymphadenitis after Mycobacterium bovis BCG vaccination. The strain of M. bovis BCG identified was found to be resistant to isoniazid and rifampin. The patient was treated with a special pharmacological regimen involving isoniazid (in a limited, strategic manner), ethambutol, streptomycin, and IFN-γ, after which there was complete resolution of the lesions.

Relatamos um caso raro em uma lactente com três meses e meio de idade, portadora de imunodeficiência primária (defeito no eixo IFN-γ/IL-12), que apresentou linfadenite supurativa após a vacinação por Mycobacterium bovis BCG, cepa essa resistente a isoniazida e rifampicina. Após o tratamento com um esquema medicamentoso especial com isoniazida (de forma estratégica e limitada), etambutol, estreptomicina e IFN-γ, houve a cura completa das lesões.

Accuracy of the QuantiFERON-TB Gold in Tube for diagnosing tuberculosis in a young pediatric population previously vaccinated with Bacille Calmette-Guerin / Precision del quantiferon-tb gold in tube en el diagnostico de tuberculosis en una poblacion pediatrica joven previamente vacunada con Bacille Calmette-Guerin / Acurácia do QuantiFERON-TB Gold in Tube no diagnóstico de tuberculose em uma população pediátrica jovem previamente vacinada com Bacille Calmette-Guérin

Objective: To evaluate the accuracy of an interferongamma release assay (QuantiFERON-TB Gold in Tube) for diagnosing Mycobacterium tuberculosis infection in a young pediatric population. Methods: 195 children previously vaccinated with BCG were evaluated, being 184 healthy individuals with no clinical or epidemiological evidence of mycobacterial infection, and 11 with Mycobacterium tuberculosis infection, according to clinical, radiological, and laboratory parameters. A blood sample was obtained from each child and processed according to the manufacturer's instructions. The assay performance was evaluated by a Receiver Operating Characteristic (ROC) curve. Results: In the group of 184 non-infected children, 130 (70.6%) were under the age of four years (mean age of 35 months). In this group, 177 children (96.2%) had negative test results, six (3.2%) had indeterminate results, and one (0.5%) had a positive result. In the group of 11 infected children, the mean age was 58.5 months, and two of them (18%) had negative results. The ROC curve had an area under the curve of 0.88 (95%CI 0.82-0.92; p<0.001), disclosing a predictive positive value of 81.8% for the test (95%CI 46.3-97.4). The assay sensitivity was 81.8% (95%CI 48.2-97.2) and the specificity was 98.8% (95%CI 96-99.8). Conclusions: In the present study, the QuantiFERON-TB Gold in Tube performance for diagnosing M. tuberculosis infection was appropriate in a young pediatric population. .

Objetivo: Evaluar la precisión de una prueba de liberación de interferón gama (QuantiFERON-TB Gold in Tube) para el diagnóstico de la infección por el Mycobacterium tuberculosis en una población pediátrica. Métodos: Se evaluaron 195 niños previamente vacunados con BCG, siendo 184 niños sanos sin evidencia clínica o epidemiológica de infección por el M. tuberculosis, y 11 niños con infección, definida conforme a criterios clínicos, radiológicos y laboratoriales. Se obtuvo una muestra de sangre de cada niño, que fue procesada conforme a las instrucciones del fabricante. El desempeño del ensayo fue evaluado mediante una curva de características operacionales (curva ROC). Resultados: En el grupo de 184 niños no infectados, 130 (70,6%) tenían menos que cuatro años (promedio de 35 meses). En este grupo control, 177 niños (96,2%) tuvieron un resultado negativo de la prueba, mientras que 6 niños (3,2%) presentaron resultado indeterminado, y un niño (0,5%) tuvo un resultado positivo. En el grupo de 11 niños con infección, el promedio de edad era de 58,5 meses, y 2 niños (18%) presentaron resultado negativo. La curva ROC determinó un área bajo la curva de 0,876 (95%IC 0,82-0,92; p<0,001), evidenciando un valor predictivo positivo del 81,8% para la prueba (95%IC 46,3-97,4). La sensibilidad de la prueba fue de 81,8% (95%IC, 48,2-97,2) y la especificidad de 98,8% (95%IC, 96-99,8). Conclusión: En el presente estudio, el desempeño del QuantiFERON-TB Gold in Tube para el diagnóstico de la infección por el M. tuberculosis fue adecuado cuando utilizado en una población pediátrica joven. .

Objetivo: Avaliar a acurácia de um teste de liberação de interferon-gama (QuantiFERON-TB Gold in Tube) para diagnosticar a infecção pelo Mycobacterium tuberculosis em uma população pediátrica. Métodos : Avaliaram-se 195 crianças previamente vacinadas com BCG, sendo 184 sadias, sem evidência clínica ou epidemiológica de infecção pelo M. tuberculosis, e 11 com infecção, definida de acordo com critérios clínicos, radiológicos e laboratoriais. Obteve-se uma amostra de sangue de cada criança, processada conforme as instruções do fabricante. Avaliou-se o desempenho do ensaio por meio de uma curva de características operacionais (curva Receiver Operating Characteristic - ROC). Resultados : No grupo de 184 crianças não infectadas, 130 (70,6%) eram menores de quatro anos (média de 35 meses). Nesse grupo, 177 crianças (96,2%) tiveram resultado negativo do teste, seis (3,2%) apresentaram resultado indeterminado e uma (0,5%) teve resultado positivo. No grupo de 11 crianças com infecção, a idade média era de 58,5 meses e duas (18%) apresentaram resultado negativo. A curva ROC determinou uma área sob a curva de 0,88 (IC95% 0,82-0,92; p<0,001), evidenciando um valor preditivo positivo de 81,8% para o teste (IC95% 46,3-97,4). A sensibilidade do teste foi de 81,8% (IC95% 48,2-97,2) e a especificidade, de 98,8% (IC95% 96-99,8). Conclusões: No presente estudo, o desempenho do QuantiFERON-TB Gold in Tube para o diagnóstico da infecção pelo M. tuberculosis foi adequado quando utilizado em uma população pediátrica jovem. .

Avaliação do papel da imunidade adaptativa na obesidade: estudo experimental em animais / Evaluation of the role of adaptative immunity in obesity: study in animals

O desenvolvimento gradual e recente de uma epidemia mundial de obesidade alavancou sobremaneira o estudo dessa condição e de suas comorbidades metabólicas. No âmbito fisiopatológico, múltiplos estudos demonstraram a expressão aumentada de mediadores inflamatórios no tecido adiposo de animais e humanos obesos, o acúmulo local de macrófagos, e um papel central da inflamação no desequilíbrio da homeostase metabólica local e sistêmica na obesidade. A definição de um papel ativo dos macrófagos, e portanto da imunidade inata, na rede inflamatória do tecido adiposo, evocou a hipótese de que, similarmente a outras condições inflamatórias crônicas como a aterosclerose, a obesidade também contaria com a importante participação de elementos da imunidade adaptativa, como as células T e suas citocinas, em sua fisiopatologia. Com base nessas considerações, os objetivos principais desse estudo foram: 1) avaliar a presença das células T e o papel do interferon-gama (IFNy), clássica citocina T-helper 1 (ou Th1), na inflamação do tecido adiposo; e 2) estudar mecanismos de acúmulo das células T no tecido adiposo na obesidade, particularmente a participação do receptor CXCR3 nesse processo. Experimentos de citometria de fluxo mostraram que o tecido adiposo visceral de camundongos C57BL/6 obesos após consumo de dieta rica em gorduras apresentou maior número de macrófagos e também de células T, CD4+ e CD8+, em comparação a controles que receberam dieta pobre em gorduras. A expressão de I-Ab, marcador do complexo de histocompatibilidade principal classe II (MHC II) murino, também foi maior no tecido adiposo dos animais obesos, sugerindo a presença local da atividade de apresentação de antígeno com consequente ativação das células T. Quando estimuladas in vitro, células T derivadas do tecido adiposo de camundongos obesos produziram mais IFNy do que aquelas isoladas de controles, novamente sugerindo a ativação dessas células em um contexto de obesidade. Na análise das possíveis...

The gradual and recent development of a worldwide epidemic of obesity greatly leveraged the study of this condition and its metabolic comorbidities. In the pathophysiologic context, multiple studies have demonstrated increased expression of inflammatory mediators in adipose tissue of obese animals and humans, the local macrophage accumulation, and a central role of inflammation in the imbalance of local or systemic metabolic homeostasis in obesity. The concept of an active role of macrophages and thus of innate immunity in the inflammatory network of adipose tissue, suggested the hypothesis that, similar to other chronic inflammatory conditions such as atherosclerosis, obesity also count on the participation of important elements of adaptive immunity such as T cells and their cytokines in its pathophysiology. Based on these considerations, the main objectives of this study were: 1) to evaluate the presence of T cells and the role of interferon-gamma (IFNy), classic T-helper 1 (Th1) cytokine, in adipose tissue inflammation, and 2) to study mechanisms of T cell accumulation in adipose tissue in the context of obesity, particularly the involvement of CXCR3 receptor in this process. Flow cytometry experiments showed that the visceral fat tissue of C57BL/6 obese mice fed a high fat diet showed a greater number of macrophages and also T cells, including CD4+ and CD8+ cells, compared to controls fed a low-fat diet. The expression of I-Ab, murine marker of class II major histocompatibility complex (MHC II), was also higher in adipose tissue of obese animals, suggesting the presence of local antigen presentation and consequent T cell activation. When stimulated in vitro, T cells derived from adipose tissue of obese mice produced more IFNy than those isolated from controls, again suggesting the activation of these cells in the context of obesity. In the analysis of possible functions of IFNy in adipose tissue, stimulation of 3T3 -L1 cells differentiated into adipocytes...

Biomarcadores diagnósticos de tuberculose em pleurologia / Diagnostic biomarkers of tuberculosis in pleurologia

Atualmente o diagnóstico de tuberculose pleural pode ser realizado com a dosagem de biomarcadores diagnósticos no líquido pleural, especificamente com a dosagem da enzima adenosina desaminase. Os quadros clínico, laboratorial, imagem e citopatologia sugestivos sempre devem ser valorizados no conjunto do diagnóstico. Tal abordagem elege somente o procedimento de toracocentese como necessário para início do diagnóstico. Na maioria das apresentações clínicas, procedimentos cirúrgicos mais invasivos (biopsias pleurais), com complicações potencialmente fatais, não precisam ser realizados para exame histopatológico

Currently the diagnosis of pleural tuberculosis can be performed with the dosage of diagnostic biomarkers in pleural fluid, specifically the enzyme adenosine deaminase. The clinical, imaging and cytology suggestive should always be valued in the set of diagnosis together laboratory measurements. This approach selects only a thoracentesis procedure for early diagnosis. In most clinical presentations, more invasive surgical procedures (pleural biopsies) with life-threatening complications for histopathological examination

The influence of leptin on Th1/Th2 balance in obese children with asthma / Influência da leptina no equilíbrio Th1/Th2 em crianças asmáticas obesas

OBJECTIVE: In individuals with asthma, obesity induces the production of leptin and is associated with disease severity. Our objective was to evaluate the levels of serum leptin and their effect on Th1/Th2 balance in obese and non-obese children with asthma, as well as to investigate the association between serum leptin levels and clinical outcomes. METHODS: We evaluated 50 atopic children with physician-diagnosed moderate-to-severe persistent asthma and 20 controls. The children with asthma were divided into two groups, by body mass index percentile: obese (n = 25) and non-obese (n = 25). From all subjects, we collected peripheral blood samples in order to determine the levels of leptin, IFN-γ, and IL-4. Asthma severity was assessed by an asthma symptom score, and the results were correlated with the parameters studied. RESULTS: Serum leptin levels were significantly higher in the obese asthma group than in the non-obese asthma group, as well as being significantly higher in the children with asthma than in the controls, whereas IFN-γ levels were significantly higher and IL-4 levels were significantly lower in the obese asthma group than in the non-obese asthma group. In addition, the obese asthma group showed higher asthma symptom scores and significantly lower FEV1 (% of predicted) than did the non-obese asthma group. There was a significant positive correlation between leptin and IFN-γ levels only in the obese asthma group. CONCLUSIONS: Although leptin is involved in the pathogenesis of asthma in obese and non-obese children, its effect is more pronounced in the former. In the presence of high leptin levels, only obese children with asthma exhibited Th1 polarization, with higher IFN-γ levels and greater asthma severity. .

OBJETIVO: A obesidade induz a produção de leptina em asmáticos e está associada à gravidade da doença. Nosso objetivo foi avaliar os níveis de leptina sérica e seu efeito no equilíbrio Th1/Th2 em crianças asmáticas obesas e não obesas e investigar a associação desses níveis com desfechos clínicos. MÉTODOS: O estudo envolveu 50 crianças atópicas com diagnóstico médico de asma persistente moderada a grave e 20 controles. Os asmáticos foram agrupados como obesos (n = 25) e não obesos (n = 25) de acordo com o percentil do índice de massa corpórea. Amostras de sangue periférico foram coletadas de todos os sujeitos, e os níveis de leptina, IFN-γ e IL-4 foram determinados. A gravidade da asma foi avaliada por um escore de sintomas de asma, e os resultados foram correlacionados com os parâmetros estudados. RESULTADOS: Os níveis séricos de leptina foram significativamente maiores nos asmáticos obesos do que nos asmáticos não obesos, assim como nos asmáticos comparados aos controles, enquanto os níveis de IFN-γ foram significativamente maiores e os de IL-4 foram significativamente menores nos asmáticos obesos do que nos asmáticos não obesos. Os asmáticos obesos tiveram maiores escores de sintomas de asma e VEF1 (% do previsto) significativamente menor que os asmáticos não obesos. Houve uma correlação positiva significativa entre os níveis de leptina e IFN-γ somente entre os asmáticos obesos. CONCLUSÕES: Embora a leptina esteja envolvida na patogênese da asma em crianças asmáticas obesas ou não, seu efeito é maior naquelas obesas. Na presença de altos níveis de leptina, somente as crianças asmáticas obesas apresentaram polarização Th1 com ...

Análise da magnitude da resposta imunocelular através da medição da capacidade de produção de interferon γ após estimulaçao celular com peptídeos do HIV 1 subtipo C, nos indivíduos infectados por HIV na cidade de Maputo / Magnitude analysis of immunocellular response through measuring interferon-γ production capacity after cell stimulation with HIV-1 subtitle c peptides in HIV-infected individuals in Maputo city

Desde que a síndrome de imunodeficiência adquirida (sida) foi descrita pela primeira vez em 1981, a infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (hiv) tornou-se uma epidemia global. Embora os usuários de drogas intravenosas, hemofílicos, fetos de mães contaminadas e receptores de transfusão constituam grupos de riscos bem caracterizados, a transmissão sexual (homossexual e heterossexual) é responsável pela maioria dos casos de infecção entre adultos em todo o mundo sendo que a região subsahariana de áfrica é a que maiores taxas apresenta. Neste estudo, o objectivo é avaliar a magnitude da resposta imunocelular contra os peptídeos do hiv-1 subtipo c em indivíduos infectados pelo hiv-1 através da quantificação da produção de interferon gama (inf-γ) pelas pbmcs de indivíduos infectados por hiv em diferentes estágios imunológicos (imunodeprimidos, imunocompetentes e intermediários) usando o ensaio elispot. Foram usados peptídeos do hiv-1 subtipo c dos genes gag, env, pool, vpr, vif e tat . Os peptídeos g3 do gene gag, p7 do gene pol e vp 2 do gene vpr estimularam respostas imunes em indivíduos imunocompetentes tendo- se mostrado deste modo como benéficos nos benéficos na estimulação de respostas imunes. Este resultado significa que estes peptídeos podem ser usados como candidatos para uma provável vacina contra o hiv do subtipo c circulante na maioria das regiões do sul de África.

Evaluation of the immunocellular response for hiv-1 subtype c peptides in hiv infected patients in maputo city. Since the Acquired ImmunoDeficiency Syndrome (AIDS) was first described in 1981, infection by Human Immunodeficiency Virus (HIV) has become a global epidemic. Although intravenous drug users, hemophiliacs, childrens born from infected mothers and blood transfusion recipients constitute well known high risk groups, sexual transmission (heterosexual and homosexual) is responsible for the vast majority of new infections among adults worldwide and the Sub-Saharan of Africa region carries the highest burden of new infections. Thus, it is urgent to conduct research projects addressing potential vaccines or vaccines candidates specific for subtypes of HIV circulating in this region so as to decrease HIV infections. This study aimed to evaluate the magnitude of the cellular immune response by ELISPOT assay, against the antigens of HIV-1 subtype C-infected individuals with HIV-1, quantifying the gamma interferon production by PBMCs of HIV-infected individuals at different immunological stages using the ELISPOT assay. Were used peptides of HIV-1 subtype C, gene of Gag, Env, Pol, vpr, Vif and Tat. The peptides G3 from gene Gag, P7 from Pol and VP 2 from gene VPr stimulated immune responses in immunocompetent individuals having thus been shown to be beneficial in stimulating immune responses. This result means that these peptides can be used as a likely candidate for vaccine against HIV subtype C circulating in most regions of South Africa.

Análise da magnitude da resposta imunocelular através da medição da capacidade de produção de interferon-γ após estimulaçao celular com peptídeos do hiv-1 subtipo c, nos indivíduos infectados por hiv na cidade de maputo / Evaluation of the immunocellular response for hiv-1 subtype c peptides in hiv infected patients in maputo city

Desde que a síndrome de imunodeficiência adquirida (SIDA) foi descrita pela primeira vez em 1981, a infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (HIV) tornou-se uma epidemia global. Embora os usuários de drogas intravenosas, hemofílicos, fetos de mães contaminadas e receptores de transfusão constituam grupos de riscos bem caracterizados, a transmissão sexual (homossexual e heterossexual) é responsável pela maioria dos casos de infecção entre adultos em todo o mundo sendo que a região subsahariana de África é a que maiores taxas apresenta. Neste estudo, o objectivo é avaliar a magnitude da resposta imunocelular contra os peptídeos do HIV-1 subtipo C em indivíduos infectados pelo HIV-1 através da quantificação da produção de Interferon gama (INF-γ) pelas PBMCs de indivíduos infectados por HIV em diferentes estágios imunológicos (Imunodeprimidos, imunocompetentes e intermediários) usando o ensaio ELISPOT. Foram usados peptídeos do HIV-1 subtipo C dos genes Gag, Env, Pool, VPr, VifeTat. Os peptídeos G3 do gene Gag, P7 do gene Pole VP 2 do gene VPr estimularam respostas imunes em indivíduos imunocompetentes tendo-se mostrado deste modo como benéficos nos benéficos na estimulação de respostas imunes. Este resultado significa que estes peptídeos podem ser usados como candidatos para uma provável vacina contra o HIV do subtipo C circulante na maioria das regiões do Sul de África.

Since the Acquired Immunodeficiency Syndrome (AIDS) was first described in 1981, infection by Human Immunodeficiency Virus (HIV) has become a global epidemic. Although intravenous drug users, hemophiliacs, children's born from infected mothers and blood transfusion recipients constitute well known high risk groups, sexual transmission (heterosexual and homosexual) is responsible for the vast majority of new infections among adults worldwide and the Sub-Saharan of Africa region carries the highest burden of new infections. Thus, it is urgent to conduct research projects addressing potential vaccines or vaccines candidates' specific for subtypes of HIV circulating in this region so as to decrease HIV infections. This study aimed to evaluate the magnitude of the cellular immune response by ELISPOT assay, against the antigens ofHIV-1subtypeC-infected individuals with HIV-1, quantifying the gamma interferon production by PBMCs of HIV-infected individuals at different immunological stages using the ELISPOT assay. Were used peptides of HIV-1subtype C, gene of Gag, Env, Pol, vpr, Vif and Tat. The peptidesG3from gen Gag, P7 from Poland VP 2from gene VPr stimuli ate immune responses in immunocompetent individual shaving thus been shown to be beneficial in stimulating immune responses. This result means that these peptides can be used as a likely candidate for vaccine against HIV subtype C circulating in most regions of South Africa.